一、简介
Chromalite®系列反相色谱树脂采用高交联度的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)作为基质,刚性强,固定相中含有键合官能团,利用基质骨架本身就具有的强疏水性能,直接作为反相分离填料,相比常规硅胶反相填料,具有粒径分布均一、粒径可控、耐受pH范围宽等优点。
粒径大小从分析HPLC级(3µm)到大型色谱(150-300µm)不等,从实验室规模到工厂规模,该系列产品涵盖所有的粒径分布以及应用。从Chromalite AD系列、Chromalite PCG系列到Chromalite MN系列,汇通色谱提供不同规格型号的Chromalite系列的反相树脂填料供客户筛选。
Chromalite AD和Chromalite PCG刚性聚合物反相树脂广泛用于分析和反相色谱纯化。
二、特点
随着树脂生产和制造技术的改进和新应用的发现,聚合物树脂在现代液相色谱中的应用越来越频繁。现代聚合物树脂已经克服了早期使用的相关问题,例如溶胀。新型树脂的高刚性和强度使它们能在高洗脱液流速下正常使用,从而加快分离。随着合成树脂的工艺改,使用聚合材料填装的色谱柱可以达到超过100,000plates/m的柱效。此外,在特定的应用中,相对硅胶基质材料,对更极端的pH条件、缓冲盐等添加剂,聚合物比硅填料具有明显的优势。聚合树脂广泛适用于氨基酸、多肽、小分子的纯化和分析蛋白质,如胰岛素、有机酸、碳水化合物和无机阳离子和阴离子。
①刚性聚合物骨架确保优异的压力流量性能;
②较高的线性操作流速可用于更快的工艺产量并减少循环时间;
③宽pH适用范围,运行条件pH1-14都非常稳定;
④高分辨率、高柱效和高回收率;
⑤高批间重现性,易于放大;
⑥极好的生物相容性,可忽略的非特异性吸附。
三、技术参数
色谱树脂分类
分析和制备级生物色谱树脂 | |
粒径范围 | 应用 |
3, 4,5 μm | 分析(HPLC) |
10,15 μm | 制备(HPLC) |
10,35,50,75 μm | 蛋白质处理或精制、小分子和合成生物分子、蛋白质重组、前段捕获、脱盐、纯化、固相萃取 |
>75μm | 大型纯化、脱盐、蛋白质和合成生物分子精制 |
型号 | Chromalite®系列色谱树脂 | ||
层析模式 | 反相 | ||
粒径大小(μm) | 3、5、10、15、75、200 | ||
可选孔径(Å) | 100 | 300 | |
化学稳定性 | 适用于各种常规有机相/水及缓冲盐体系 | ||
密度(g/mL) | 0.36±0.04 | ||
比表面及(m2/g) | 790 | 480 | |
孔容(mL/g) | 0.90 | 0.85 | |
pH适用范围 | 1-14 | ||
体积变化 | 甲醇膨胀系数 | ≤15% | ≤3% |
pH 1-14 | 可忽略 | ||
0.01-1 M NaCl | 可忽略 |
Chromalite AD
Chromalite AD1和AD2采用高交联度的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)作为基质,具备优异的化学和物理稳定性。Chromalite AD1和AD2高效液相色谱树脂本身就具有强的疏水性,是C18或C8的优良替代品。其中10um和15um粒径的树脂广泛用于反相制备色谱。
Chromalite AD1具有中等孔径(100 Å),是分离中小分子(MW < 1000Da)的理想材料,可代替孔径为50 - 100A的C8/C18硅胶材料。Chromalite AD2孔径的率较大(300 - 700 Å),是分离合成低聚物、生物分子、多肽、小蛋白和寡核苷酸等大分子(MW > 1000Da)的理想选择。
图1 - Chromalite AD1的电镜(15um)
粒径分布均匀 | 可控孔隙 |
Chromalite AD1 15um |
Chromalite PCG
Chromalite PCG树脂是一种大孔疏水性聚苯乙烯树脂,可用于高、中、低压反相色谱。三种不同的孔径使Chromalite PCG树脂能够适应各种不同的分子物质的纯化分离。
①高孔径: Chromalite PCG 1200,孔隙度300 - 700Å
②中孔径: Chromalite PCG 900,孔隙度为200 - 300Å
③低孔径: Chromalite PCG 600,孔隙度为100Å
④Chromalite PCG树脂可用于反相高效液相色谱或中低压的RP-LC:
⑤12 -18um(Chromalite PCG 1200F15)
⑥20 - 55 um(F级)
⑦50 - 100 um(M级)
⑧85 - 150 um(C级)
图2 Chromalite PCG1200F15的电镜(12 – 18um)
粒径分布均匀 | 可控孔隙 |
Chromalite PCG1200F15 (12 – 18 micron) |
图3 - PCG1200F(20 – 55um)和PCG1200M(50 – 100um)的光学照片
F级别树脂 | M级别树脂 |
Chromalite MN
与传统聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物如Chromalite PCG和AD不同,Chromalite MN采用先进的制造工艺合成高交联超大网孔聚苯乙烯,其最终结构是一个膨胀的、刚性的三维网络结构。
开放式的超交联网络具有极高的比表面积(可达1000-1500m2/g),超交联聚苯乙烯的内部是由直径约为2.0至4.0 nm的小微孔组成的网络结构,超大比表面积和微孔结构使得小分子化合物可以很好地接触到整个内部,这保证其对许多小分子有机物的有效吸附,特别适合于固相萃取(SPE)。Chromalite MN系列树脂特别适用于具有中小型芳香型有机化合物的固相萃取。
超交联聚苯乙烯的化学稳定性好,能承受200℃以上的高温,Chromalite MN也可应用于现代高温高效液相色谱。
Chromalite MN特点:
①批次的重现性好;
②高的比表面积产生高的载量;
③极佳的pH稳定性 (1 - 14);
④干燥填料方便储层和运输量。
Chromalite MN颗粒分布非常窄,它有三种不同的颗粒尺寸:
①9 – 11um: Chromalite 10MN;
②13.5 - 16.5um: Chromalite 15MN;
③65 – 75um: Chromalite 70MN。
图4 - Chromalite 70MN的光学照片
四、应用
胰岛素
胰岛素是一种广泛应用于糖尿病治疗的肽类激素。胰岛素的分子量约为5800,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个氨基酸,B链有30个氨基酸。A-B链之间有两处二硫键相连。
目前,胰岛素主要是利用重组微生物(大肠杆菌)发酵生产的。工业生产上胰岛素纯化一般是,发酵液通过离心过滤后先用离子交换树脂去除发酵过程中的杂质,再通过反相色谱法去除胰岛素类似物,实现粗胰岛素的工业纯化。Chromalite PCG系列树脂可以完美替代反相硅胶色谱填料,除此之外,刚性强以及广泛地pH耐受性保证填料的实用寿命。Chromalite PCG1200树脂能实现制备规模上的有效分离,通过线性放大,能轻松的放大到生产制备中。
图5 – 15um PCG1200F15和C8分离纯化对比
图6 –PCG1200F15和PCG1200F分离度对比
原料药
缓激肽是一种9个氨基酸的肽链,分子量为1059,用于降低血压。杆菌肽是由芽孢杆菌属微生物产生的相关环状寡肽(MW 1422)的混合物,是一种有效的局部抗菌药物。短杆菌肽是含有15个氨基酸的寡肽,分子量约为1880,它的治疗用途仅限于局部抗菌应用。下图为三种多肽在Chromalite PCG系列树脂上的分离。
图7 –缓激肽、杆菌肽、短杆菌肽在Chromalite PCG 900F和Chromalite PCG 600F上分离
芳香化合物
图8 –用Chromalite树脂和工业合成树脂分离芳香族化合物
五、货号
粒径 | <5um | 10um | 15um | 35um | 75um | >200um |
AD系列 | 4AD1 | 10AD1 | 15AD1 | |||
5AD1 | 10AD2 | 15AD2 | ||||
3AD2 | ||||||
5AD2 | ||||||
MN系列 | 3MN | 10MN | 15MN | 70MN | ||
5MN | ||||||
PCG系列 | PCG1200F15 | PCG1200F | PCG1200M | PCG1200C | ||
PCG900F | PCG900M | PCG900C | ||||
PCG600F | PCG600M | PCG600C |
注: AD/PCG:大孔型,高交联度。其孔隙度在聚合过程中经特别设计,生成小、中和很大孔径的各种颗粒。
MN:超大网孔聚苯乙烯吸附剂,其特点为超大比表面积和微孔结构,这保证其对许多小分子有机物的有效吸附。特别适合于固相萃取(SPE)。